常见的TUNEL产品主要有2大类,一类是荧光TUNEL产品(适用于荧光显微镜检测),一类是DAB显色TUNEL产品(适用于普通光学显微镜检测)。
对于有荧光显微镜的实验室,我们推荐使用荧光TUNEL产品。
荧光TUNEL产品与DAB显色TUNEL产品相比,具有以下优势:
1.实验时间短:荧光TUNEL产品的操作步骤相对简单,可以更快速地完成实验流程。
2.操作简便:荧光TUNEL实验通常更为简便,易于操作,适合快速获得结果。
3.结果易观察:荧光TUNEL的实验结果为荧光图片,可以直接在荧光显微镜下观察,结果更直观。
4.易于发表:荧光TUNEL的实验结果为荧光图片,这种直观的结果显示更易于在SCI文章中发表。
5.多种荧光染料选择:荧光TUNEL产品提供多种荧光染料选择,适用于不同的实验需求和样本特性。
6.性价比高:荧光TUNEL产品的关键组分自研,质量稳定,价格相对更划算。
7.灵敏度高:荧光TUNEL产品的灵敏度高,适用于对凋亡细胞的精确检测。
如何选择合适的TUNEL荧光试剂盒呢?
1.看荧光显微镜配置
荧光显微镜由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成,它利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大,从而对样品结构或其组分进行定性、定位、定量观察检测。
DAPI用紫外光激发后发射蓝光,FineTest®488和FITC用蓝光激发后发射绿光,FineTest®594和FineTest®555用绿光激发后发射红光,各荧光素具体光谱信息见下表。
荧光素 | 激发波长 | 发射波长 |
FITC | 490 | 520 |
FineTest®488 | 495 | 519 |
FineTest®555 | 555 | 565 |
FineTest®594 | 590 | 617 |
FineTest®647 | 650 | 665 |
2.看实验样本是否带有荧光
根据实验样本自带荧光情况,选择TUNEL试剂盒遵循以下原则:
①实验样本不含荧光或者红光,推荐选用One-step TUNEL Assay Kit (Green, FITC)或者One-step TUNEL Assay Kit (Green, Elab Fluor®488)。一般来说,FineTest®488的抗淬灭效果优于FITC,如果需要长时间观察样本的绿色荧光推荐使用One-step TUNEL Assay Kit (Green, FineTest®488)。
②如果实验样本带绿光,推荐选用One-step TUNEL Assay Kit (Red, FineTest®594)或者One-step TUNEL Assay Kit (Red, FineTest®555)。
③如果实验样品中同时有红色荧光和绿色荧光,推荐选用One-step TUNEL Assay Kit (Red, FineTest®647),但是FineTest®647对荧光显微镜要求比较高,需要显微镜配置有Cy5或FineTest®647滤光片,一般共聚焦显微镜配置有该滤光片。
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